遺産相続？

お父さんの遺した家をお母さんが相続しているのなら、家はお母さんのもので
成人して結婚して別世帯の主さん夫婦がその家に住み着く権利はないと思います。
誰を住まわせるのかはお母さんの自由です。

パッと感じた事ですが、お母さんは経済的に子供世帯に頼りたいのかと思いました。

妹さんが結婚して、旦那さんが経済的に問題なく同居を承諾したのなら
お母さんに頼ってくる主さん夫婦よりも妹さん夫婦をおいた方が自分が潤うと考えたのでしょう。

まさか妹一家と主さん一家とお母さんで雑居するわけにも行かないでしょうから。

そういうお母さんなら妹一家の事情が変わったら当たり前の様に主さん一家に戻る様に命じるかもしれませんね。

義実家を頼って、もうご自分の実家とは疎遠にしたらどうですか？
お母さんの老後も、祭祀も、全て妹さんに譲るから、と。

主さんも、長女だからと色々背負わされる義務はないと思います。
お母さんの都合のいい様に振り回される必要はありません。